Читать онлайн «Тритиевая планиграфия биологических макромолекул : [Монография]»

ТРИТИЕВАЯ ПЛАНИГРАФИЯ биологических макромолекул Глава 1 ОСНОВЫ И ТЕХНИКА МЕТОДА ТРИТИЕВОЙ ПЛАНИГРАФИИ Какой бы экспериментальный метод исследования структуры мы ни использовали, крайне важно хорошо представлять себе границы и возможности его применения, связь определяемых параметров с реальными структурными характеристиками изучаемого объекта. Только при этом условии можно надеяться на корректную интерпретацию получаемых данных и на исключение артефактов, практически неизбежно сопутствующих любому эксперименту. Очевидно, что такой грамотный подход требует понимания процессов, в результате которых и получается искомая информация. Это важно при использовании как обычных, "классических" методов и подходов, так и, в особенности, новых, нетрадиционных. При всей своей кажущейся простоте метод тритиевой планиграфии на деле весьма сложен в части структурной интерпретации экспериментальных данных и требует знания физики и химии процессов, составляющих его основу. Опыт показал, что простого описания техники и общих принципов метода, подобного тому, которое принято включать в журнальные публикации в раздел "эксперимент", недостаточно для грамотного его использования. Положение осложняется тем, что экспериментатор, работающий в области структурной и физико-химической биологии, а именно этой категории исследователей и адресован метод, очень часто имеет лишь самые общие представления о физике атомных пучков и кинетике элементарных химических актов. Еще труднее требовать от специалиста физика или химика понимания специфических свойств биологических объектов, без знания которых в принципе невозможна корректная постановка эксперимента. Эти обстоятельства побудили авторов включить в данную работу специальную главу, в которой мы в сжатой форме постарались дать описание основных физических принципов, составляющих фундамент метода тритие- вой планиграфии, кинетики основных элементарных химических процессов, обусловливающих образование меченых продуктов, определение которых и дает искомую структурную информацию. С нашей точки зрения, полезным может быть описание практической части эксперимента, включающее стандартные приемы работы с высоковакуумной техникой, низкими температурами, а также методы, используемые при анализе исследуемых объектов. В каждом конкретном случае специфика исследуемого объекта неизбежно вносит свои особенности, но многие приемы имеют общий характер. Авторы надеются, что такого рода материал окажется полезным для понимания результатов, полученных при изучении конкретных биологических объектов и систем, которое составляет основную часть работы, а также позволит сформулировать и поставить новые задачи в областях, в которых метод тритиевой планиграфии еще не нашел своего применения. 1. 1. Горячие атомы Сам термин "горячие атомы" обязан своим происхождением ядерной химии и связан с открытием Сциллардом и Чалмерсом в 30-х годах химических эффектов, сопровождающих ядерные реакции. Образующиеся в результате ядерных реакций атомы "уносят" избыток энергии в форме кинетической энергии (атомы отдачи) и стабилизируются в виде химических соединений, отличных от исходного "материнского" продукта.